NRC標(biāo)準(zhǔn)品 N-磺酰氨甲酰膝溝藻毒素-2&3（CRM-C1&2）的制備

從塔瑪亞歷山大藻的大規(guī)模實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)物中分離出N-磺酰氨甲酰膝溝藻毒素-2&3（C1&2），然后通過(guò)幾個(gè)色譜步驟進(jìn)行純化[4]。通過(guò)LC-MS/MS[5,6]（Figure 1和Figure 2）和1'H NMR確認(rèn)C182的結(jié)構(gòu)和純度。

使用LC高分辨率MS（LC-HRMS），C1和C2的[M+H]*離子的測(cè)量準(zhǔn)確度為476.04998（C1oHaN-O11s'為4=0.2 ppm）。通過(guò)LC-ox-FLD[7]（Figure 3）、UVv（CE-UV）毛細(xì)管電泳[8]和化學(xué)發(fā)光氮檢測(cè)（LC-CLND）LC進(jìn)一步評(píng)估純度[9]。

儲(chǔ)備溶液通過(guò)在稀乙酸（20μM，pH 5）中稀釋純化的C1和2來(lái)制備，以使用1H-NMR（qNMR）[10]進(jìn)行定量。通過(guò)在脫氣稀乙酸（20μM，pH 5）中精確稀釋儲(chǔ)備溶液來(lái)制備NRC標(biāo)準(zhǔn)品 N-磺酰氨甲酰膝溝藻毒素-2&3（CRM-C1&2）。等分樣品被分配到干凈的充滿氬氣的琥珀色玻璃安瓿中，并立即用火焰密封。每個(gè)安瓿含有大約0.5 mL溶液。